1、pcr的模板可以是蛋白質(zhì)PCR模板制備是PCR實(shí)驗(yàn)的首要步驟，模板制備是從待分析樣本中純化和濃縮核酸DNA或RNA以作為PCR擴(kuò)增模板的過(guò)程由于PCR用途多樣，用于提取核酸的材料可能是全血?jiǎng)又参锝M織培養(yǎng)細(xì)胞口腔涂片體液。

2、你好，你要擴(kuò)增哪里，那里就是你的說(shuō)的目的片段和基因本身沒有什么具體關(guān)系可以擴(kuò)增基因內(nèi)的一部分序列內(nèi)含子也好外顯子也好內(nèi)含子+外顯子也好，可以擴(kuò)增基因外的間隔序列，完全是根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定的。

3、因?yàn)閮蓚€(gè)模板顯示出形式不一樣做的時(shí)候一般是提取植物總的RNA，然后采用OligodT或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，主要是獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)，判斷目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的相對(duì)量的變。

4、第二種從mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得，在這種情況下，mRNA的cDNA，與原來(lái)的基因組DNA相同而且無(wú)內(nèi)含子相反地，對(duì)應(yīng)于在原來(lái)基因中沒有的而在mRNA存在的3#39末端的poly A序列等的核苷序列上，與外顯子序列先導(dǎo)序列以及后續(xù)序列等一起。

5、應(yīng)該是指樣品中DNA樣品的來(lái)源或種類例如，如果提取的是基因組DNA，由于基因組DNA數(shù)量比較多，引物可能會(huì)與多個(gè)位點(diǎn)結(jié)合，需要優(yōu)化PCR條件，否則可能獲得非特異擴(kuò)增，或是沒有擴(kuò)增結(jié)果而如果純化的是質(zhì)粒DNA，模板復(fù)雜度就低。

6、1首先PCR是體外大量擴(kuò)增目的DNA的技術(shù)你問(wèn)模板DNA是什么，這是不需要問(wèn)的，你想擴(kuò)增的目的基因是什么什么就是模板你用cDNA來(lái)做PCR模板當(dāng)然是cDNA雙鏈了一定是雙鏈cDNA做模板，引物當(dāng)然不是cDNA了，而是可以與。

7、PCR技術(shù)的基本原理該技術(shù)是在模板DNA引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下，依靠于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)DNA聚合酶以單鏈DNA為模板，借助一小段雙鏈DNA來(lái)啟動(dòng)合成，通過(guò)一個(gè)或兩個(gè)人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中。

8、PCR合成的時(shí)候當(dāng)然不只是需要引物，模板鏈也就是目的基因片段是必須的因?yàn)镈NA聚合酶合成DNA時(shí)只能從一段已有的DNA片段往上加脫氧核苷酸延伸子鏈，而不能從頭合成，所以需要一段引物引物就是目的基因在5#39段的一小段序列。

9、quot所以做PCR，用反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA做引物quot你這個(gè)理解是不對(duì)的，cDNA就是是作PCR模板用的mRNA反轉(zhuǎn)錄的時(shí)候，是會(huì)有片段斷裂或者不完整，但是，mRNA的拷貝數(shù)有幾十萬(wàn)甚至幾千萬(wàn)個(gè)，不會(huì)每個(gè)mRNA拷貝在你擴(kuò)增的目的基因處都。

10、RNA做模板就是所謂的反向PCR了耐高溫不是聚合酶的通性，聚合酶一般都不耐高溫，所以雖然PCR的思想早就有了，但是因?yàn)闆]有耐高溫的聚合酶所以才無(wú)法付諸實(shí)踐，直到后來(lái)從水生棲熱菌中發(fā)現(xiàn)了Taq才使得PCR被廣泛使用。

11、注意事項(xiàng) 首先是確定的總體積，可以選擇10ul， 20ul， 50ul等其次是根據(jù)mix，算出總體積中mix使用的體積根據(jù)自己提取或者逆轉(zhuǎn)錄得到的DNA濃度，以及一次pcr反應(yīng)所使用模板的量，計(jì)算出DNA的體積根據(jù)引物濃度以及引物使用。

12、引物是用來(lái)限制目的序列位置的，左右兩端各需要一個(gè)引物限制，所以是兩條模板是已經(jīng)確定含有目的DNA序列的基因細(xì)胞液溶液等等，只要你確定里邊含有目的基因，就可以通過(guò)PCR將其大量擴(kuò)增。

13、你可以理解為打印文件，需要模板就是要復(fù)制，所以要找到需要的基因片段，用剪切酶取出來(lái)，不需要模板就是可以寫文件直接打印出來(lái)，最后都是復(fù)制。

14、兩個(gè)都可以雙鏈當(dāng)然可以，單鏈的話只要與其中一個(gè)引物結(jié)合延伸，就成雙鏈了。

15、在實(shí)時(shí)熒光PCR中模板的定量有2種方法絕對(duì)定量和相對(duì)定量絕對(duì)定量一般通過(guò)已知的標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)確定我們所感興趣基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量指在一定樣品中靶序列相對(duì)于另一參照序列的量的變化如果你做的是DNA的定量，可以用DNA。

16、pcr需要的原料有物PCR引物為DNA片段，細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的引物為一段RNA鏈酶dNTP模板和緩沖液PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫經(jīng)常是60°C左右時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合。

17、1引物和模板在加之前離不離心 跟以后有沒有條帶沒有關(guān)系PCR沒有條帶一般是因?yàn)楦魑镔|(zhì)之間的比例或者退火溫度不合適，你需要調(diào)整和優(yōu)化每換一種試劑都要重新優(yōu)化PCR條件2把水bufferDntpmg離子做一個(gè)mixture。

18、PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)Polymerase chain reaction的縮寫，它是體外酶促合成特異DNA片段的方法這一方法的要點(diǎn)是合成兩個(gè)分別互補(bǔ)于待擴(kuò)增DNA片段兩端的小片段引物，在含有引物待擴(kuò)增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反應(yīng)體系。